Уреаза

Обозначение:Наименование:Бобовые. Продукты из соевых бобов. Определение активности уреазыСтатус:ДействуетДата введения:01.07.2017Дата отмены:-Заменен на: -Код ОКС:67.060Скачать:

Текст ГОСТ ISO 5506-2013 Бобовые. Продукты из соевых бобов. Определение активности уреазы

Pulses. Soya bean products. Determination of urease activity

Дата введения 2017-07-01

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»Сведения о стандарте

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Казахстан

Госстандарт Республики Казахстан

Киргизия

Кыргызстандарт

Молдова

Институт стандартизации Молдовы

Россия

Росстандарт

Таджикистан

Таджикстандарт

Узбекистан

Узстандарт

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ7 ПЕРЕИЗДАНИЕ. Август 2018 г.Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

1 Область применения

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Термины и определения

3.1 активность уреазы (urease activity): Количество аммиачного азота, выделяемого в минуту при рабочих условиях, установленных в настоящем стандарте, выраженное в миллиграммах азота на грамм полученного готового продукта.

4 Сущность метода

5 Реактивы

5.1 Урея (мочевина), буферный раствор (рН 6,9-7,0 ед. рН).Буферный раствор необходимо получить, растворив 4,45 гдигидрофосфата двунатриевого водорода () и 3,40 г дигидрофосфата калия () в воде и довести до 1000 см.Растворяют 30 г уреи () в буферном растворе. Срок хранения полученного раствора — 1 мес.

5.2 Соляная кислота, раствор, с (HCI) = 0,1 моль/дм.

5.3 Гидроокись натрия, стандартный мерный раствор, с (NaOH) = 0,1 моль/дм.

6 Средства измерений и испытательное оборудование

6.1 Сито с размером отверстий 200 мкм.

6.2 Аппарат для потенциометрического титрованияили рН-метр, чувствительный с точностью до 0,02 ед. рН, с автоматической бюреткой и магнитной мешалкой._______________ Автоматический аппарат для титрования позволяет получить более точные результаты.

6.3 Колба для титрования.

6.4 Термостатически управляемая водяная баня, допускающая управление при температуре (30±0,5)°С.

6.5 Лабораторные пробирки, размерами: диаметр 18 мм и длина 150 мм, с пробкой.

6.6 Пипетки, емкостью 10 см, и градуированные с ценой деления 0,1 см.

6.7 Измельчитель, допускающий измельчение без нагревания (например, гранулятор).

6.8 Хронометр.

6.9 Аналитические весы с пределами допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания ±0,1 г.

6.10 Термометр жидкостный стеклянный с диапазоном измерения от 0°С до 100°С, с ценой деления 1,0°С.

7 Отбор проб

8 Приготовление лабораторной пробы

9 Порядок проведения испытания

9.1 Рабочая пробаНеобходимо поместить в лабораторную пробирку (см. 6.5) около 0,2 г пробы (раздел 8) и взвесить с точностью до 0,1 мг.Примечание 1 — Для проб очень высокой активности рабочую пробу необходимо уменьшить до 0,05 г.Примечание 2 — Рекомендуется, чтобы пробы, имеющие содержание жира более 10% (м/м), были предварительно обезжирены методом холодной экстракции.

9.2 ОпределениеПри помощи пипетки (см. 6.6) добавляют 10 см буферного раствора мочевины (см. 5.1). Сразу закрывают пробирку пробкой и энергично встряхивают. Помещают пробирку в водяную баню (см. 6.4) при температуре (30±0,5)°С и выдерживают ее в течение 30 мин (время измеряют хронометром) (см. 6.8). При помощи пипетки (см. 6.6) сразу добавляют 10 см раствора соляной кислоты (см. 5.2), быстро охлаждают до температуры 20°С и переносят содержимое пробирки в мерную колбу для титрования (см. 6.3), дважды промывая пробирку водой объемом 5 см.Титруют сразу раствором гидроокиси натрия (см. 5.3) до рН 4,70 ед. рН при помощи потенциометрического аппарата (см. 6.2).

9.3 Количество испытанийНеобходимо выполнить два испытания рабочих проб из одной лабораторной пробы.

9.4 Контрольное испытаниеВ пробирку (см. 6.5) необходимо ввести 10 см буферного раствора мочевины (см. 5.1) и 10 см раствора соляной кислоты (см. 5.2), измеренных пипеткой (см. 6.6). Необходимо добавить рабочую пробу, равную рабочей пробе главного испытания, взвешенной с точностью до 0,1 мг. Пробирку закрывают и энергично встряхивают.Помещают пробирку в водяную баню (см. 6.4) при температуре (30±0,5)°С и выдерживают ее в течение 30 мин (измеряют хронометром, см. 6.8). Охлаждают до температуры 20°С, перемещают содержимое пробирки в колбу для титрования (см. 6.3), как установлено в 9.2, и титруют раствором гидроокиси натрия (см. 5.3) до рН 4,70 ед. рН.

10 Выражение результатов

10.1 Метод вычисленияАктивность уреазы в миллиграммах азота, выделяемого в минуту на грамм продукта в готовом виде, вычисляют по формуле

, (1)

где — объем 0,1 моль/дм раствора гидроокиси натрия, использованного в контрольном испытании (см. 9.4), см; — объем 0,1 моль/дм раствора гидроокиси натрия, использованного в определении (см. 9.2), см; — масса рабочей пробы (см. 9.1), г; — точная концентрация использованного раствора гидроокиси натрия, моль/дм.За результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух определений, если выполняется требование повторяемости (см. 10.2).Результат округляют до двух знаков.Примечание 1 — При выполнении предварительной сушки (см. раздел 8) вычисление изменяют соответственно.Примечание 2 — Если активность уреазы должна вычисляться относительно сухого вещества, тогда она равна:

, (2)

где — активность уреазы;- содержание влаги и летучего вещества продукта, которое определяют в соответствии с ISO 771, %.

10.2 ПовторяемостьРазница между значениями двух определений, выполненных в скоростной последовательности одним лаборантом при использовании одного оборудования на одной лабораторной пробе, не должна превышать 10% от среднеарифметического значения.

11 Протокол испытаний

Приложение ДА (справочное). Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам

Обозначение международного стандарта

Степень соответствия

*

*

*

* Соответствующий межгосударственный стандарт отсутствует.

УДК 635.655:577.152.351:006.35

МКС 67.060

IDT

Ключевые слова: сельскохозяйственные продукты, пищевые продукты, соя, соевые бобы, химический анализ, аммиачный азот, активность уреазы

allgosts.ruПревью ГОСТ ISO 5506-2013 Бобовые. Продукты из соевых бобов. Определение активности уреазы

ПРОИЗВОДСТВО ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ → Пищевые масла и жиры. Семена масличных культур

ГОСТ 13979.9-69. Жмыхи и шроты. Методика выполнения измерений активности уреазы

Настоящий стандарт распространяется на жмыхи, шроты, получаемые при переработке соевых семян, и устанавливает методику выполнения потенциометрического измерения активности уреазы в интервале значений 0,05-2,0 рН

Название на англ.: Oilcakes and oilmeals. Measurement of urease activity
Тип документа: стандарт
Статус документа: действующий
Число страниц: 3
Дата актуализации текста: 22.03.2010
22.03.2010
Дата издания: 01.03.2002
01.01.1970
Дата последнего изменения: 23.06.2009
Переиздание: переиздание с изм. 1
Взамен в части: ГОСТ 12220-66 в части определения активности уреазы

Поправки и изменения:

Молекулярная модель уреазы бактерии Helicobacter pylori

Уреаза (от греч.ούρον — моча и -аза — стандартный аффикс биохимической номенклатуры, указывающий на принадлежность вещества к классу ферментов) — гидролитический фермент из группы амидаз, обладающий специфическим свойством катализировать гидролиз мочевины до диоксида углерода и аммиака:

CO(NH2)2 + H2O → CO2 + 2NH3

Уреаза обнаружена в бактериях (например, у уробактерий), дрожжах, растениях (особенно много её содержится в семенахсои), а также у ряда беспозвоночных; в клетках животных, у которых в качестве основного продукта азотистого обмена образуется мочевина, уреаза отсутствует. В организме человека и животных уреаза образуется бактериальной флорой. В 1926 году американский биохимик Джеймс Самнер доказал, что уреаза это белок.

Характеристики

  • Молекулярная масса: 480 000 а. е. м.
  • Оптимальный водородный показатель (pH): 7,4
  • Оптимальная температура: 60 °C
  • Ингибиторы: тяжёлые металлы (Pb2+), пероксид водорода, ацетогидроксамовая кислота. Реактивация уреазы, ингибированной тяжелыми металлами возможна при взаимодействии с этилендиаминтетрауксусной кислотой.
  • Ферментативная специфика: мочевина и гидроксимочевина.

Уреаза состоит из двух субъединиц (α и β), соединённых в димеры, которые, в свою очередь, соединяются друг с другом в тримеры (αβ)3. Тримеры формируют особую сложную структуру ((ab)3)4. Необычная уреаза была найдена у Helicobacter pylori, у которой 4 из 6 обычных субъединиц фермента объединены общий комплекс из 24 субъединиц (α12β12). Считается, что этот надмолекулярный комплекс обеспечивает дополнительную стабильность фермента у этой бактерии, которая производит аммиак для того, чтобы нейтрализовать соляную кислоту желудочного сока. Наличие высокой активности уреазы используется как диагностический признак бактерий Helicobacter и Ureaplasma urealyticum.

Использование в диагностике

Некоторые болезнетворные микроорганизмы желудочно-кишечного тракта и мочевыводящих путей вырабатывают уреазу, что позволяет использовать уреазный тест (в совокупности с другими критериями) для их идентификации, а при определенных обстоятельствах и для полуколичественного определения. Известны лабораторные методы определения содержания мочевины в моче, основанные на её гидролизе в присутствии соевой уреазы с последующим измерением количества аммиака, выделившегося в результате реакции.

Другие способы использования

Биосенсоры на основе уреазы для обнаружения тяжёлых металлов использовались для количественной оценки общего загрязнения воды ионами тяжёлых металлов.

Эта страница в последний раз была отредактирована 9 марта 2017 в 05:55. Используемые источники:

  • https://allgosts.ru/67/060/gost_iso_5506-2013
  • https://rosstandart.msk.ru/gost/001.067.200/gost-13979.9-69/
  • https://wiki2.org/ru/уреаза

Оцените статью
Рейтинг автора
5
Материал подготовил
Андрей Измаилов
Наш эксперт
Написано статей
116