Сульфитредуцирующие клостридии в воде

Содержание

Обозначение:Наименование:Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы выявления и подсчета сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условияхСтатус:ДействуетДата введения:01/01/2016Дата отмены:-Заменен на: -Код ОКС:07.100.30Скачать:

Текст ГОСТ 29185-2014 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы выявления и подсчета сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условиях

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ. МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

ГОСТ

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

29185—

СТАНДАРТ

2014

(ISO 15213:2003)

МИКРОБИОЛОГИЯ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ И КОРМОВ для животных

Методы выявления и подсчета сульфитредуцирующих бактерий,

растущих в анаэробных условиях

(ISO 15213:2003, MOD)

Издание официальное

Москва

Стамдартинформ

2015

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стан* дартиэации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные. лравила и рекомендации ло межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1 ПОДГОТОВЛЕН Государственным научным учреждением «Всероссийский научноисследовательский институт консервной и овощесушильной промышленности» Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИКОП Россельхозакадемии) на основе аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в пункте 5

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 29 августа 2014 г. No 69-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование строим по МК (ИСО 3166)004-97

Кол страны по МК <ИСО 3166)004-97

Сокращенное наименование иаииоиапьного органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргыэстандарт

Молдова

MD

Молдова-Стандарт

Россия

RU

Росстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 сентября 2014 г. N9 1174-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 29185-2014 (ISO 15213:2003) введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2016 г.

5 Настоящий стандарт модифицирован по отношению к международному стандарту ISO 15213:2003 Microbiology of food and animal feeding stuffs — Horizontal method for the enumeration of sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic conditions (Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод подсчета сульфитвосстанавливающих бактерий, растущих в анаэробных условиях) путем изменения структуры, содержания отдельных структурных элементов, слое, фраз для учета особенностей национальной экономики указанных выше государств и особенностей межгосударственной стандартизации, выделенных в тексте курсивом.

Сравнение структуры настоящего стандарта со структурой указанного международного стандарта приведено в дополнительном приложении ДА.

Международный стандарт разработан подкомитетом ISO/ТС 34/SC 9 «Микробиология» технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 «Пищевые продукты» Международной организации по стандартизации (ISO).

Перевод с английского языка (еп).

Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, и межгосударственных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации.

Степень соответствия — модифицированная (MOD).

Ссылки на международные стандарты, которые приняты в качестве межгосударственных стандартов. заменены в разделе «Нормативные ссылки» и тексте стандарта ссылками на соответствующие идентичные межгосударственные стандарты.

6 ВЗАМЕН ГОСТ 29185-91

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется е ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты». а текст изменении и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случав пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также е информационной системе общего пользования — на официальном сайпю Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ. 2015

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

Содержание

Приложение ДА (обязательное) Сравнение структуры международного стандарта со структурой

ГОСТ 29185—2014 (ISO 15213:2003)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МИКРОБИОЛОГИЯ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ И КОРМОВ ДЛЯ животных

Методы выявления и подсчета сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условиях

Microbiology of food and animal feeding stuffs.

Methods for detection and enumeration of sulfite-reducing bacteria growing under anaerobic conditions

Дата введения — 2016—01—01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и корма для животных и устанавливает метод выявления сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условиях, и метод определения их количества путем посева продукта в плотные питательные среды.

Метод посева в плотные питательные среды предназначен для пищевых продуктов, содержащих в 1 г твердого продукта не менее 150 или в 1 см3 жидкого продукта не менее 15 колониеобразующих единиц (КОЕ) сульфитредуцирующих бактерий.

Методы также применимы для испытания проб окружающей среды, отобранных из зон производства и переработки пищевых продуктов.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ ISO 7218-2011 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям

ГОСТ ISO 11133*1 -2011 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть 1. Общие руководящие указания по обеспечению качества приготовления культуральных сред в лаборатории

ГОСТ ISO 11133*2-2011 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть 2. Практические руководящие указания по эксплуатационным испытаниям культуральных сред

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия.

ГОСТ 10444.1-84 Консервы. Приготовление растворов реактивов, красок, индикаторов и питательных сред, применяемых в микробиологическом анализе

ГОСТ 26669-85 Продукты пищевые и вкусовые. Подготовка проб для микробиологических анализов

ГОСТ 26670-91 Продукты пищевые. Методы культивирования микроорганизмов

ГОСТ 30425-97 Консервы. Метод определения промышленной стерильности

Примечание — При пользовании настоящим стандартом цепе сообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального

Издание официальное

агентства по техническому регулированию и метролопы в саги Интернет или по ежегодному информационному указателю «(Национальные стандарты)», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемеся’+юпо информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 сульфитредуцирующие бактерии, растущие в анаэробных условиях: Бактерии, образующие типичные колонии, выращиваемые в условиях, установленных в настоящем стандарте.

3.2 сульфитредуцирующие бактерии рода Clostridium: Сульфитредуцирующие бактерии, принадлежность которых к роду Clostridium подтверждена в соответствии с настоящим стандартом.

3.3 выявление сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium: Установление факта присутствия или отсутствия сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium в определенной навеске продукта в соответствии с методом, указанным в настоящем стандарте.

3.4 определение количества сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium: Подсчет числа колониеобразующих единиц (КОЕ) сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium, содержащихся в см3 или г продукта, в соответствии с методом, установленным в настоящем стандарте.

4 Сущность методов

Методы выявления и определения количества сульфитредуцирующих бактерий основаны на высеве определенного количества продукта и (или) его разведений в плотные питательные среды, культивировании посевов в оптимальных для роста условиях и при необходимости, подсчета их количества и определения морфологических и биохимических свойств для подтверждения принадлежности сульфитредуцирующих бактерий к роду Clostridium.

5 Растворы для разведений, питательные среды, растворы реактивов

5.1 Растворы для разведений

Растворы для разведений готовят по [1H4J. ГОСТ 26669 или по конкретному стандарту на исследуемый продукт.

5.2 Питательные среды, растворы реактивов

Для приготовления питательных сред и растворов используют дистиллированную воду по ГОСТ

6709.

Химические вещества, используемые для приготовления питательных сред и растворов, должны быть аналитического качества.

Обеспечение качества приготовляемых питательных сред и проведение их эксплуатационных испытаний по ГОСТ ISO 11133-1 и ГОСТ ISO 11133-2.

5.3 Среда для выявления и подсчета сульфитредуцирующих бактерий:

железосульфитный агар

5.3.1 Состав:

ферментативный перевар казеина — 15 г:

панкреатический перевар сои — 5 г:

дрожжевой экстракт — 5 г;

Натрия пиросульфит (Na2S25) — 1 г;

Железо (III) аммоний цитрат — 1 г;

Агар —9-18 гм;

Вода — 1000 см3.

5.3.2 Приготовление

Растворяют ингредиенты в воде при нагревании. Если необходимо, устанавливают pH так, чтобы после стерилизации он составлял 7,6 ± 0.2 при температуре 25 °С.

Разливают среду по 250 см3 во флаконы или колбы вместимостью 500 см3. Если для посева используют пробирки (6.6). то среду разливают в пробирки высоким столбиком — 10-11 см. Среду стерилизуют в течение 15 мин в автоклаве при (121 ± 1) вС.

Непосредственно перед использованием среду деаэрируют.

Эксплуатационные испытания готовой среды аналогично испытаниям среды TS по ГОСТ ISO 11133-2.

5.4 Допускается использование готовых и дегидратированных питательных сред, в т.ч. хромогенных, и их компонентов, по качеству не уступающих вышеуказанным.

Приготовление и применение питательных сред — е соответствии с нормативными документами стран, принявших стандарт.

6 Оборудование и лабораторная посуда

Приемлемой альтернативой посуды многоразового применения является одноразовая посуда, если она отвечает соответствующим требованиям. Одноразовая посуда предпочтительнее многоразовой.

Применяют микробиологическое лабораторное оборудование по ГОСТ ISO 7218, ГОСТ 10444.1.

6.1 Оборудование для сухой стерилизации (сушильный шкаф), обеспечивающий поддержание температуры в пределах от 160 до 180 °С или стерилизации насыщенным паром (авлюклавы).

6.2 Гомогенизатор, смеситель или миксер для подготовки проб не жидких продуктов (см. ГОСТ ISO 7218);

6.3 Баня водяная, обеспечивающая работу при температуре 44 °С — 47 *С с максимально допустимым отклонением температуры ± 0.5 *С.

6.4 Анаэробный сосуд (анаэростат). с устройством для создания ан- аэробной атмосферы.

6.5 Инкубатор (термостат), поддерживающий температуру (37 ± 1) °С и. если необходимо,

(50 ± 1) ®С.

6.6 Пробирки размером 16 мм * 160 мм и колбы или флаконы вместимостью 500 см3.

6.7 pH-метр. обеспечивающий измерение с точностью ± 0.05 единиц pH. с разрешением 0.01 единицы pH;

6.8 Чашки Петри, стеклянные или пластмассовые диаметром от 90 до 100 мм или. если необходимо. 140 мм:

6.9 Пипетки, градуированные для бактериологического применения, номинальной вместимостью 10 см3. 2 см3 и 1 см3, с ценой деления 0.5 и 0.1 см3, и с выходным отверстием с номинальным диаметром от 2 до 3 мм.

6.10 Бактериологическая петля из ллатиноиридиееого или никель хромового сплава диаметром около 3 мм.

6.11 Микроскоп оптический, обеспечивающий увеличение 1000х при просмотре в проходящем свете, оснащенный устройством для фазово-контрастной микроскопии.

7 Отбор проб

Отбор проб — по нормативным документам стран, принявших стандарт.

Важно, чтобы в лабораторию поступала представительная проба, которая не была повреждена или изменена при транспортировке или хранении.

Отбор проб не является частью метода, установленного в настоящем стандарте. 8 случае отсутствия конкретного стандарта на отбор проб продукта рекомендуется, чтобы заинтересованные стороны достигли согласия по процедуре отбора проб.

11 В зависимости от копирующих свойств агара.

8 Приготовление пробы для испытания

Пробы для испытания приготавливают в соответствии с ПНИ). ГОСТ 26669 или стандартом на конкретный продукт. При отсутствии соответствующего стандарта рекомендуется, чтобы заинтересованные стороны достигли согласия по данному вопросу.

9 Метод проведения испытания

9.1 Общие требования

Схема проведения испытания приведена в приложении А.

9.2 Проба для анализа, исходная суслензия и разведения

См. (1) или конкретный стандарт на исследуемый продукт.

Если необходимо, для обеспечения гибели вегетативных форм иЛши неспорообразующих форм бактерий применяют тепловую обработку исходной суспензии или жидкого продукта. Температура и время тепловой обработки варьируют от умеренного теплового пастеризационного эффекта (например 75 °С в течение 20 мин) до кипения в течение нескопьких минут. В этом случае результат подсчета выражают как число спор сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условиях.

9.3 Инокуляция

Берут две стерильные чашки Петри. Переносят в каждую чащку с помощью стерильной пипетки 1 смэ испытуемой пробы, если она жидкая, или 1 см3 исходной суспензии в случае испытания других продуктов.

Берут две другие стерильные чащки Петри. Переносят в каждую чашку с помощью другой стерильной пипетки 1 см3 первого десятикратного разведения (101 ) испытуемой пробы, если продукт жидкий, или 1 см3 первого десятикратного разведения исходной суспензии (102) при испытании других продуктов.

Повторяют описанную процедуру с последующими разведениями, используя для каждого очередного разведения новую стерильную пипетку.

При выявлении сульфитредуцирующих бактерий в определенной пробе для анализа ее высевают в чашку Петри или пробирку.

Помещают в каждую чашку Петри приблизительно 15 см3 железосульфитного агара (5.3). который находится при температуре 44 *С — 47 вС в водяной бане (6.3). Время между инокуляцией чашек Петри и заливкой их питательной средой не должно превышать 15 мин. Тщательно перемешивают инокулят со средой и в горизонтальном положении дают среде застыть.

После того как среда застынет, вносят от 5 до 10 см3 той же среды для образования второго

слоя.

В случае использования для посева пробирок со средой инокулируют 1 см3 жидкого продукта или разведением две пробирки со средой, находящейся при температуре 44 9С — 47 *С. Перемешивают осторожно содержимое пробирок, не допуская образования пузырьков воздуха в толще среды, и помещают посевы в пробирках для застывания в холодную водяную баню.

После того как среда застынет, вносят от 2 до 3 см3 той же среды в каждую пробирку для образования второго слоя.

9.4 Посевы в чашках Петри инкубируют в анаэростате (6.4) при температуре (37 ± 1) °С в течение 24 — 48 ч.

Если выявляют термофильные бактерии, готовят другие посевы (см. 9.3) и инкубируют их при температуре (50 ± 1)еС.

В случае посева в пробирки инкубирование в анаэростате необязательно.

9.5 Подсчет колоний

После 24-48 ч термостатирования посевов подсчитывают количество колоний разной степени черной окраски. При выявлении сульфитредуцирующих бактерий в определенной массе или объеме пробы продукта для анализа подсчет количества выросших типичных колоний не проводят. Черные колонии, окруженные черной зоной, относят к сульфит редуцирующим бактериям.

Примечание — Расплывчатое не специфическое почернение среды может наблюдаться в тех случаях. когда посев проводят в пробирки, а не в чашки Петри. Рост анаэробных бактерий, которые продуцируют водород (а не H3S). может также уменьшить содержание сульфитов в питательной среде и привести к общему почернению среды.

Подсчитывают колонии сульфитредуцирующих бактерий в каждой чашке Петри, где их количество менее 150. а количество всех выросших колоний не превышает 300.

Когда число выросших колоний в пробирках большое, их трудно подсчитать. В этом случае для подсчета могут быть использованы только те пробирки, в которых присутствуют отдельные колонии.

Примечание — Методы, приведенные в стандарте, могут быть использованы для выявления суль-фитредуцирующих бактерий рода Clostridium. При этом после выявления типичных колоний берут 5 колоний с каждой чашки и подтверждают принадлежность к роду Clostridium путем проведения дополнительных тестов.

9.6. Подтверждение принадлежности выделенных сульфитредуцирующих бактерий к

роду Clostridium

9.6.1 Микроскопироеание

Из культур. выросших, как указано в 9.5. готовят два препарата и окрашивают по ГОСТ 30425: первый — по Гоаму. второй — для выявления бактериальных спор.

Сульфитрвдуцируюшив бактерии рода Clostridium представляют собой грампопожитепьные или грамвариабвльныв палочки, располагающиеся в одиночку. попарно. е виде цепочек или скоппе-ний параллельных клеток. При спорообразовании споры супьфитрвдуцируюших бактерий рода Clostridium овальные или сферические, субтерминальные или терминальные.

Допускается окраску по Граму заменять тестом Грегорсена. Для этого на предметном стекле е капле 3 %-ного водного раствора гидроокиси калия эмульгируют культуру микроорганизмов. взятую из колонии с плотной среды. Если через несколько секунд взвесь ослизнявтся и за петлей тянутся слизистые нити, то это указывает на принадлежность испытуемой культуры к грамотрицатепьным бактериям. У грамположительных бактерий слизистых нитей не образуется.

9.6.2 Определение отсутствия каталазы

Отсутствие каталазы в культурах, выросших, как указано е п. 9.5, определяют по ГОСТ 30425.

Супьфитредуцирующив бактерии рода Clostridium каталазу не образуют.

9.6.3 Подтверждение анаэробного роста

Подтверждение анаэробного роста проводят посевом по ГОСТ 30425 культур, выросших, как указано е п. 9.5, е чашки Петри под стекло или е трубки Вейона. или инкубируют посевы е анаэробных условиях. Для посева используют плотную питательную среду (S.1). Посевы инкубируют по 9.4. Для сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium характерен анаэробный рост.

Допускается вместо подтверждения анаэробного роста проводить определение отсутствия роста е аэробных условиях. При этом культуры высевают в чашки Петри на поверхность плотной среды.

Посевы инкубируют е аэробных условиях при температуре (37 ± 1) °С в течение 18 — 72 ч. а для выявления термофильных бактерий — при температуре (50 ± 1)°С.

10. Обработка результатов

10.1 Результаты испытания оценивают по каждой пробе отдельно.

10.2 Если при изучении культуральных, морфологических и биохимических свойств обнаружены супьфитредуцирующив грампопожитвпьныв или грамвариабвльныв. каталаэоотрицательныв. способные расти в анаэробных условиях микроорганизмы, то дают заключение о том. что эти микроорганизмы относятся к сульфитредуцируюшим бактериям рода Clostridium (меэофипъным или термофильным).

Если дополнительные подтверждающие тесты не проводились (9.6). то при наличии роста типичных колоний дают заключение о том. что эти микроорганизмы относятся к сульфитредуцируюшим бактериям.

10.3 Если при подтверждении характерных колоний е 80% случаев, то есть не менее чем е 4 из 5 колоний подтвержден рост супьфитрвдуцируюших бактерий рода Clostridium, то считают.

что все характерные колонии, выросшие на чашке Петри или пробирке (см. п. 9.5), принадлежат к этому роду. В остальных случаях количество сульфитредуцируюших бактерий рода Clostridium определяют. исходя из процентного отношения подтвержденных колоний к общему количеству характерных колоний, взятых для подтверждения.

10.4 Пересчет количества сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцируюших бактерий рода Clostridium на 1 г или 1см3 продукта проводят по ГОСТ 26670.

10.5 Результаты определения количества сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцируюших бактерий рода Clostridium записывают поГОСТ 26670.

10.6 Результаты выявления присутствия (отсутствия) сульфитредуцирующих бактерий или сульфитредуцируюших бактерий рода Clostridium с указанием количества пробы для анализа записывают следующим образом: «сульфитредуцирующив бактерии или сульфитредуцируюшие бактерии рода Clostridium обнаружены (или не обнаружены) в X г или X см3 продукта».

11 Протокол испытаний

Протокол испытаний должен включать:

a) всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы;

b) использованный метод отбора проб, если он известен:

c) использованный метод испытания, включая температуру инкубации и температурный прогрев для гибели вегетативных клеток (если он применялся);

d) все детали, не установленные в настоящем стандарте или считающиеся необязательными, наряду с подробным описанием всех обстоятельств, которые могли повлиять на результаты:

e) полученные результаты испытания.

Протокол испытаний может также содержать информацию о результатах проведения дополнительных тестов.

12 Требования безопасности

Общие требования к проведению микробиологического испытания и требования к персоналу — по ГОСТ ISO 7218.

Приложение А (обязательное)

Схема проведения анализа

Приложение ДА (обязательное)

Сравнение структуры международного стандарта со структурой межгосударственного стандарта

Таблица ДА.1

Струмура международного стандарта

Структура межгосударственного стандарта

Подраздел

Пункт

Подпункт

Раздел

Пункт

Подпункт

1

1

2

2

3

3

3.1

3.1

3.2

3.3

3.4

4

4

4.1

4.2

4.3

5

5

5.1

5.1.1

5.1

5.1.2

5.2

5.2

5.3

5.3.1

5.3.2

5.4

6

6

6.1

6.1

6.2

6.2

6.3

6.3

6.4

6.4

6.5

6.5

6.6

6.7

Окончание таблицы ДА. 1

Структура международною стандарта

Структура мемюсударсгеенною стандарта

Подраздел

Пункт

Подпункт

Раздел

Пункт

Подпункт

6.8

6.9

6.10

6.11

7

7

8

8

9

9

9.1

9.1

9.2

9.2

9.3

9.3

9.4

9.4

9.5

9.5

9.6

9.6.1

9.6.2

9.6.3

10

10

10.1

10.2

10.3

10.4

10.5

10.6

11

11

12

Приложение А

Приложение А

Приложение ДА

Библиография

Библиография

Библиография

[11 ISO 6887-1:1999 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для испытаний. исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований. Часть 1. Общие правила приготовления исходной суспензии и десятичных разведений

[2] ISO 6887-2:2003 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. При готов л еже проб для испытаний. исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований. Часть

2. Специальиые правила для приготовления мяса и мясных продуктов

[3] ISO 6887-3:2003 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. При готов л еже проб для испытаний. исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований. Часть

3. Специагъиые правила для приготовления рыбы и рыбных продуктов

(4| ISO 6887-4:2003 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление проб для испытаний. исходах суспензий и десятичных разведений для мисробиологических исследований. Часть 4. Специальные правила для приготовления продуктов, кроме молока и молочных продуктов, мяса и мясных продуктов. рыбы и рыбных продуктов

УДК 663:543.9:006.354 МКС 07.100.30 MOD

Ключевые слова: сульфитредуцирующие бактерии, сульфитредуцирующие бактерии рода Clostridium, инкубирование посевов, каталаза, окраска по Граму. рост в анаэробных условиях, методы выявления и подсчета количества сульфит редуцирующих бактерий и сульфитредуцирующих бактерий рода Clostridium

Подписано в почать 03.03.2015. Формат 60×84%.

Уел. пом. л. 1.86. Тираж 31 экз. Зак. 1003

Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

. 123995 Москва. Гранатный пер.. 4.

amp_logo.pngallgosts.ruПревью ГОСТ 29185-2014 Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы выявления и подсчета сульфитредуцирующих бактерий, растущих в анаэробных условиях

Сульфитредуцирующие клостридии представляют собой грамположительные спорообразующие палочки крупного размера. Микроорганизмы данной группы отличаются способностью восстанавливать сульфиты до сульфидов. Данное свойство активно применяется при их определении в лабораторных условиях.

Учитывая, что умением редуцировать сульфиты отличаются только споровые анаэробы, имеющие кишечное происхождение, данная их особенность позволила отнести представленную группу микроорганизмов к санитарно-показательным. При этом самым распространенным представителем сульфитредуцирующих клостридий является Clostridium perfringens.

Данный микроорганизм относится к постоянным консорбентам кишечного тракта, но при этом имеет меньшую численность, чем более распространенный род E. coli. Споры СРК отличаются высокой устойчивостью к воздействиям окружающей среды. С учетом данной особенности, при обнаружении бактерий можно судить о давнем фекальном загрязнении воды.

О роли сульфитредуцирующих бактерий как индикаторах загрязнения

Если предметно говорить о ценности спор СРК как индикатора фекального загрязнения, то она довольно невысока. Связано это с тем, что данные грамположительные микроорганизмы отличаются умением размножаться в окружающей среде при благоприятных условиях. Это означает, что они могут долгое время находиться в жидкости, усложняя тем самым интерпретацию результатов исследований. Это также касается и воды, хотя наиболее интенсивный рост наблюдается в почве.

Однако это не значит, что от таких бактерий нет пользы вообще. Сульфитредуцирующие клостридии могут выступать в роли важного индикатора оценки качества обеззараживания воды, так как отличаются устойчивостью к агрессивным воздействиям не только внешней среды, но и дезинфицирующих средств и стерилизующих приемов. Микроорганизмы данной группы являются первыми, пробивающими барьер, который может появляться при дефектах в работе систем обеззараживания.

Также бактерии могут относиться к определителям биологического загрязнения воды. В частности, их обнаружение во взятом образце может свидетельствовать о возможном присутствии цист и ооцист простейших яиц гельминтов, которые имеют схожесть по уровню устойчивости.

Особенности учета спор СРК в Российской Федерации

В РФ количественный учет грамположительных спорообразующих бактерий ведется в случае проведения санитарных исследований воды в открытых водоемах, а также при контроле качества водоподготовки. В данном случае анализ проб на споры СРК выполняется с применением среды Вильсон-Блера. В других случаях потребуется непосредственное обращение в сертифицированную лабораторию для заказа услуги отбора проб и проведения необходимых анализов в самом испытательном центре.

Определение сульфитредуцирующих бактерий в воде

В наши дни для определения и учета сульфитредуцирующих бактерий в пробах воды задействуются высокочувствительные и высокоспецифичные среды, в которых находятся соли тиогликолевой кислоты, а также добавки различных антибиотиков. Использование солей позволяет добиться более высокой степени анаэробиоза, за счет чего увеличивается чувствительность метода и точность получаемого результата.

Микробиологический анализ воды

Также для оценки качества работы водоочистных систем может проводиться микробиологический анализ на наличие данного вида спор. В рамках исследования используется особый метод, направленный на выращивание посевов в железно-сульфитном агаре – для этого создаются условия, близкие к анаэробным – а также подсчет количества колоний черного цвета.

При осуществлении анализа проба воды, помещенная в пробирки, прогревается на водяной бане при температуре 75 градусов с погрешностью +/- 5 градусов. Процедура выполняется на протяжении 15 минут. Если исследуется хлорированная вода, прогрев необязателен.

Определение бактерий в воде может производиться одним из трех методов – фильтрования в пробирках, в чашках Петри или прямым посевом.

  1. Определение фильтрованием в пробирках подразумевает поддержку высоких показателей температуры среды в течение посева (от 70 до 80 градусов). После завершения обработки выбранного количества воды, фильтр помещается в пробивку с горячим агаром, распрямляя его по стенкам. По завершении посева для создания необходимых условий пробирка быстро охлаждается, а посевы культивируются в течение 16-18 часов при температуре 44 градуса.
  2. Для фильтрования при помощи чашек Петри используются емкости объемом 55-60 мл, заливающиеся небольшим слоем железо-сульфитного агара. По завершении процесса фильтр помещается на застывшую питательную среду – при этом нужно не допустить появления пузырьков воздуха. После производится культивация посевов в идентичных первому методу условиях.
  3. Прямой посев производится по схожей с фильтрованием схеме. При этом количество добавляемых проб может отличаться в зависимости от выбранных емкостей. В две пробирки объемом от 30 мл помещается по 10 мл образца, в то время как в четыре по 15 мл – 5 мл образца.

Учет результатов производится на основании количественного подсчета. При этом ему подлежат только посевы, в которых получаются изолированные колонии, имеющие черный цвет. Они могут вырастать на фильтрах или в питательной среде. Результат исследования определяется числом колониеобразующих единиц в 20 мл воды. Нормальным показателем будет отсутствие микроорганизмов в данном количестве жидкости.

Анализ воды в лаборатории «НОРТЕСТ»

Испытательный центр «НОРЕСТ» предлагает услуги по анализу воды на наличие сульфитредуцирующих бактерий. Проведение данного вида исследований, как и любого другого в нашей лаборатории, имеет ряд преимуществ для клиентов:

  • Мы имеем многолетний опыт работы.
  • В нашем штате – квалифицированные химики и микробиологи.
  • В распоряжении персонала испытательного центра – высокочувствительное новейшее оборудование, для полноценного раскрытия возможностей которого используются современные методы проведения исследований и пробоподготовки.
  • Регулярный контроль качества исследований позволяет избежать допущения малейших погрешностей.

За время работы лаборатории в достоверности и высочайшем качестве выполняемых нами исследований убедилось большое количество клиентов, которые являются как физическими, так и юридическими лицами. Проведение анализа воды на содержание СРК – это гарантия получения точных результатов в кратчайшие сроки.

Полезные статьи

Проведение анализов почвы, лабораторные исследования

Анализ воды в Сергиевом Посаде

Лаборатория НОРТЕСТ получила Лицензию Федеральной службы по гидромеотерологии и мониторингу окружающей среды

Оставьте заявку онлайн Наши сотрудники перезвонят и проконсультируют по вашему вопросу

Категории ОКС

Поиск ГОСТов по категориям Общероссийского Классификатора Стандартов

  • IT, электроника и бытовая техника
  • Добыча и переработка
  • Производство и строительство
  • Промышленность
  • Техника и оборудование
  • Общие положения 01.
  • Услуги, управление и социология 03.
  • Математика, естественные науки07.
  • Здравоохранение11.
  • Охрана окружающей среды13.
  • Метрология и измерения. Физические явления. 17.
  • Испытания. 19.
  • Технология получения изображений. 37.
  • Точная механика. Ювелирное дело. 39.

Классификатор ОКПД 2

поиск кода ОКПД 2 онлайн, все категории классификатора

Статус документа:
заменен, введён в действие 01.01.1993
Название на английском языке:
Food products. Methods for detection and quantity determination of sulphite-reducing clostridium
Дата актуализации информации по стандарту:
15.09.2019, в 21:42 (более года назад)
Вид стандарта:
Стандарты на методы контроля
Дата начала действия ГОСТа:
1993-01-01
Срок действия ограничен:
01.01.2016
Дата последнего издания документа:
2010-05-26

Коды документа ГОСТ 29185-91:

Код КГС:
Н09
Код ОКСТУ:
9109
Число страниц:
6
Назначение ГОСТ 29185-91:
Настоящий стандарт распространяется на пищевые продукты и устанавливает метод выявления в определенной навеске пищевого продукта сульфитредуцирующих клостридий и два метода определения их количества: метод наиболее вероятного числа и метод посева в агаризованную среду
ГРНТИ индекс(ы):
650181
Документ разработан орг-ей:
ВНИИ консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП)
Ключевые слова документа:
клостридии, продукты

Нормативные ссылки из текста ГОСТ 29185-91:

ISO:
ISO 7937:1985
Ссылки на ГОСТы:

Скачать ГОСТ 29185-91 вы можете в следующих версиях:

Дата добавленияв версии файла:Загрузок:Размер:Ссылка на страницу загрузки:12/12/2011 03:023210.46 Мб

  • страница 1
  • страница 2
  • страница 3
  • страница 4
  • страница 5
  • страница 6
  • страница 7

ТолкованиеПереводсульфитредуцирующие клостридии</dt>

66 сульфитредуцирующие клостридии: Спорообразующие анаэробные палочковидные бактерии, редуцирующие сульфиты до сульфидов.

Примечания

1 Широко распространены в почве, поверхностных и сточных водах, часто встречаются в фекалиях.

2 Споры сульфитредуцирующих клостридий, являясь более устойчивыми по сравнению с вегетативными формами бактерий к воздействию неблагоприятных физических и химических факторов, используются как индикатор качества обработки при водоподготовке питьевой воды

70** вибрионы: Грамотрицательные оксидазоположительные водные бактерии, имеющие форму изогнутых палочек, способные передвигаться с помощью жгутиков.

Примечание — Некоторые виды вибрионов патогенны для человека (например, Vibrio cholera и Vibrio parahaemolyticus)

Источник: ГОСТ 30813-2002: Вода и водоподготовка. Термины и определенияоригинал документа</dd>

Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации. academic.ru. 2015.

</dl>

Смотреть что такое «сульфитредуцирующие клостридии» в других словарях:

  • Пищевые продукты. Виды исследований — 40 2.10.1.19 2.10.1.20 2.10.1.23 2.10.2 ОМЧ • отдельно от ЛКП лецитиназоположительные стафилококки • на сальмонеллы 6. Условно патогенную микрофлору, в т.ч. 4. Дрожжи, плесени 2.10.6 7. Синегнойная палочка 5. Cl. perfringens 4.… …   Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

  • ГОСТ 30813-2002: Вода и водоподготовка. Термины и определения — Терминология ГОСТ 30813 2002: Вода и водоподготовка. Термины и определения оригинал документа: 65 Esherichia coli; E. coli: Аэробные и факультативно анаэробные термоустойчивые колиформные бактерии, которые ферментируют лактозу или маннитол при… …   Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

  • Методические рекомендации: Примерные нормативы деятельности органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека в условиях бюджетирования, ориентированного на результат — Терминология Методические рекомендации: Примерные нормативы деятельности органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека в условиях бюджетирования, ориентированного на результат: 2… …   Словарь-справочник терминов нормативно-технической документации

Используемые источники:

  • https://allgosts.ru/07/100/gost_29185-2014
  • https://nortest.pro/stati/voda/sulfitreducirujushhie-klostridii-v-vode.html
  • https://www.gostexpert.ru/gost/gost-29185-91
  • https://normative_reference_dictionary.academic.ru/75736/сульфитредуцирующие_клостридии

Оцените статью
Рейтинг автора
5
Материал подготовил
Андрей Измаилов
Наш эксперт
Написано статей
116